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枪炮师银弹:RNAi技术

黑色银弹高达 www.oihmf.club RNAi是在研究秀丽新小杆线虫(C. elegans)反义RNAantisense RNA)的过程RNAi实验图片中发现的,由dsRNA介导的同源RNA降解过程。

RNAi具有的特征

RNAi是转录后水平的基因沉默机制;

RNAi具有很高的特异性,只降解与之序列相应的单个内源基因的mRNA;

RNAi抑制基因表达具有很高的效率,表型可以达到缺失突变体表型的程度,而且相对很少量的dsRNA分子(数量远远少于内源mRNA的数量)就能完全抑制相应基因的表达,是以催化放大的方式进行的;

RNAi抑制基因表达的效应可以穿过细胞界限,在不同细胞间长距离传递和维持信号甚至传播至整个有机体以及可遗传等特点;

dsRNA不得短于21个碱基,并且长链dsRNA也在细胞内被Dicer酶切割为21 bp左右的siRNA,并由siRNA来介导mRNA切割。而且大于30 bpdsRNA不能在哺乳动物中诱导特异的RNA干扰,而是细胞非特异性和全面的基因表达受抑和凋亡;

ATP依赖性:在去除ATP的样品中RNA干扰现象降低或消失显示RNA干扰是一个ATP依赖的过程??赡苁?/span>DicerRISC的酶切反应必须由ATP提供能量。

RNAi的应用

1 基因功能研究

新的、快速的方法解读基因的功能和基因的表达机制以及基因之间的相互关系。而 RNAi 技术已成为解决这些问题的重要手段。与其他方法相比 ,RNAi 技术在基因功能研究上有其独特的优点 : ①简单易行 , 容易开展 ; ②与基因敲除 ( geneknockout) 相比实验周期短 , 成本低 ; ③与反义技术相比具有高度特异性和高效性 ; ④可进行高通量 (high throughout) 基因功能分析。

2 临床应用

RNAi 机制可作为真核生物的基因组免疫系统 , 抑制外源和内源有害基因的表达。人类目前对病毒 ( HIV) 所致疾病缺乏理想的治疗方法 , 如果利用 RNAi 技术把与病毒基因具同源性的 siRNA 引入感染细胞将会抑制病毒的增殖 , 这为病毒相关疾病的治疗提供了新的思路。另外 , 利用 RNAi 技术还可以高效、特异、快速的抑制细胞内癌基因的表达 , 人类的许多癌症是由于少数癌基因超表达导致细胞过度增殖所致 , 如果利用 RNAi 技术抑制过度表达的癌基因将会使癌症表型逆转或病程得以控制。

2018-09-15 09:52:10
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